专利成果

一种对抗体具有广谱吸附能力的融合蛋白制备方法及应用(专利号:201210118134.4)

日期: 2015-03-30浏览:
专利号: 201210118134.4
申请日: 2012/4/21
授权公告日: 2013/11/6
专利权人: 大连理工大学
发明人: 贾凌云;张嘉玉;任军;徐丽;谢健

摘要
    本发明公开一种对抗体具有广谱吸附能力的融合蛋白制备方法及其应用,通过基因工程手段,经过PCR扩增,连接T载体,双酶切得到蛋白A和蛋白G免疫球蛋白结合区基因,然后一起连接到表达载体pET-23a上构成重组质粒,并转化E.coli BL21(DE3),诱导表达后得到大量含有融合蛋白AG的菌体。通过超声破碎、高温加热、沉淀DNA、弱阴离子交换层析和亲和层析纯化得到融合蛋白AG。该蛋白具有蛋白A和蛋白G的双重优点,结合谱更为广泛,且对血清中白蛋白等非免疫球蛋白物质非特异性吸附低。将该蛋白作为配基连接到固相载体基质上制成吸附剂,解决了蛋白A吸附剂对IgG3结合力弱的不足,可用于抗体纯化以及血液净化等领域。